克隆动物技术包括哪些技术手段

克隆，是指通过无性生殖而产生的遗传上均一的生物群，即具有完全相同的遗传组成的一群细胞或者生物的个体。克隆在希腊语中是“小树枝叶”的意思，用以指无性增殖物。现在则指个体、细胞、基因等不同水平上的无性增殖物。

（1）个体水平：在植物的无性增殖中，植物的发芽、插条等由同一个体通过无性生殖而增长的个体群均被视为克隆。采用组织培养方法可使植物细胞培养发育成完全的个体（愈伤组织），采用这种方法得到的具有相同基因型的个体群，也被称为克隆在动物的无性增殖中，典型的例子是采用核移植实验方法，把分化细胞的核移植到一个事先去核的蛙卵中，让其发育并得到克隆蛙。克隆动物具有均一遗传性质，在研究环境条件对发育、分化的影响以及药物的检测方面都是重要的实验材料。在哺乳动物中，由于细胞分化，核异质化的程度加剧，因此核移植尚无成功的例子。

（2）细胞水平：由一个细胞经过有丝分裂生成的细胞群叫克隆。但如果培养细胞发生转化，则很容易引起染色体变异。

（3）基因水平：利用基因重组操作技术，使特定的基因与载体结合，在细菌等宿主中进行增殖，有可能得到均匀的基因群。克隆基因在基因功能与精细结构的关系等基础研究及在有用物质的生产方面，均已得到应用。

目前克隆哺乳动物的方法由简单到复杂有以下几种：

（1）胚胎分割。

胚胎分割在很多国家都认为是“克隆”，但这并不是严格意义上的克隆。将未着床

的早期胚胎用显微手术的方法一分为二，一分为四或更多次地分割后，分别移植给受体

体内让其妊娠产仔。由一枚胚胎可以克隆为两个以上的后代，遗传性能完全一样。目前

用胚胎分割法已克隆出小鼠、家兔。山羊、绵羊、猪、牛和马等。

（2）胚胎细胞核移植。

胚胎细胞核移植技术要比胚胎分割技术进了一步。它是用显微手术的方法分离来着

床的早期胚胎细胞，将其单个细胞导入去除染色体的未受精的成熟的卵母细胞，经过电

融合，让该卵母细胞质和导人的胚胎细胞核聚变、分裂、发育为胚胎。把该胚胎移植给

受体，让其妊娠产仔。目前知道的胚胎细胞核移植克隆的动物有小鼠、兔、山羊、绵羊、

猪。牛和猴子等。

（3）胚胎干细胞核移植。

将胚胎或胎儿原始生殖细胞经过抑制分化培养，让其细胞数成倍增多，但细胞不分

化，每个细胞仍具有发育成一个体的能力。把该单个细胞利用以上核移植技术，将其导

入除去染色体的成熟的卵母细胞内克隆胚胎，经移植至受体，妊娠、产仔、产生克隆动

物。

（4）胚胎嵌合。

把两枚胚胎细胞（同种或异种动物胚胎）嵌合，共同发育成为一个胚胎，称为嵌合

胚胎。再将该胚胎移植给受体，妊娠产仔。如该仔畜具有以上两种动物胚胎的细胞则称

之为嵌合体动物。如同类黑鼠和白鼠胚胎细胞嵌合，生下黑白相间的花小鼠。不同种的

绵羊和山羊胚胎细胞嵌合，可生下绵山羊，既有绵羊的特征，又有山羊的特征。目前嵌

合体动物有小鼠、大鼠、绵羊、山羊、猪和牛等种间嵌合体动物有大鼠一小鼠嵌合体

绵羊一山羊嵌合体、马一斑马嵌合体，牛一水牛嵌合体。

（5）体细胞核移植。

把动物体细胞经过抑制培养，使细胞处于休眠状态。采用以上核移植的方法，将其

导人去除染色体的成熟的卵母细胞克隆胚胎，经移植受体，妊娠产仔，克隆出动物。比

如克隆绵羊“多利”。它是从一只成年母绵羊的乳腺中取出一个本身并没有繁殖功能的

普通细胞，将这个细胞的基因分离出来备用然后，再取出另一只母绵羊的未受精的卵

细胞，将这个卵细胞的基因取出，换上第一只母绵羊乳腺细胞的基因，再将这个基因已

被“调包”的卵细胞放电激活，使其开始像正常的受精卵那样进行细胞分裂当细胞分

裂进行一定连阶段、胚胎已经形成后，再将这个胚胎植到第三只母绵羊，经过正常的妊

娠后产下