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色谱条件法

色谱条件法

色谱条件法

色谱柱的选择

色谱柱主要选择固定相和柱长。

固定相选择需注意两个方面:极性及最高使用温度。按相似性原则和混合物主要差别选择固定相。柱温不能超过最高使用温度。在分析高沸点化合物时,需选择高温固定相。气-液色谱法还要注意载体的选择。高沸点样品用比表面积小的载体、低固定液配比(1%~3%),以防保留时间过长,峰扩张严重此外,低配比时可使用较低柱温。低沸点样品宜使用高配比(5%~25%),从而增大柱的容量因子,以达到良好分离。难分离样品可用毛细管柱。

柱长加长能增加塔板数n,使分离度提高。但柱长过长,纵向扩散系数增大,峰变宽,柱阻也增加,并不利于分离。

在不改变塔板高度(H)的条件下,分离度与柱长有如下关系:

(R1/R2)2=L1/L2

2、

柱温的选择

柱温对分离度影响很大,经常是条件选择的关键。选择的基本原则是:在使最难分离的组分有符合要求的分离度的前提下,尽可能采用较低柱温,但以保留时间适宜及不拖尾为度。

低柱温可增大分配系数,增加选择性,降低组分在载气中的扩散系数,减少固定液流失,延长柱寿命及降低检测本底。但柱温降低,液相传质阻抗增加而使峰扩张,太低则拖尾,故以不拖尾为度。可根据样品沸点来选择柱温。

标签: 色谱
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