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葡萄糖鑑定原理

葡萄糖鑑定原理

葡萄糖鑑定原理

有兩種方法來測定。

第一種用菲林試劑來測定,原理為:

CH2OH(CHOH)4CHO+2[Ag(NH3)2OH](水浴加熱)→CH2OH(CHOH)4COONH4+2Ag↓+3NH3+H2O

注意事項:⑴ 試管內壁必須潔淨

⑵ 銀氨溶液隨用隨配不可久置

⑶ 水浴加熱,不可用酒精燈直接加熱

⑷ 可加入氫氧化鈉,以促進反應進行

⑸ 銀鏡可用稀HNO3浸泡洗滌除去。

加熱還原生成的銀附着在試管壁上,形成銀鏡,所以,這個反應也叫銀鏡反應。

第二種用新制的氫氧化銅溶液來測定,原理為:

葡萄糖溶液與新制氫氧化銅懸濁液反應生成磚紅色沉澱。(濃度高時生成黃色沉澱)

CH2OH(CHOH)4CHO+2Cu(OH)2---加熱→CH2OH(CHOH)4COOH+Cu2O↓+2H2O

注意事項:⑴ 新制2Cu(OH)2懸濁液要隨用隨配、不可久置。

⑵ 配製新制Cu(OH)2懸濁液時,所用NaOH溶液必須過量。

⑶ 反應液必須直接加熱至沸騰。

⑷ 葡萄糖分子中雖然含有醛基,但是d-葡萄糖中不含有醛基。

葡萄糖氧化酶法(1)原理葡萄糖氧化酶催化葡萄糖氧化反應中釋放過氧化氫,過氧化氫在過氧化物酶催化下與色原性氧受體縮合為紅色化合物,此物質在505mm處有最大吸收峯,其吸光度值和葡萄糖量成正比。

(2)步驟將血清和酶酚混合試劑混勻,置於適宜環境中保温保存,反應完畢後用調零過的分光光度計測定產物於505mm處吸光度值。根據光度值查表或計算可得到樣品中葡萄糖濃度。2.己糖激酶法(1)原理葡萄糖在己糖激酶和鎂離子存在下可同腺嘌呤三磷酸腺苷( ATP )反應,其產物葡萄糖-6-磷酸在葡萄糖-6-磷酸脱氫酶催化下可使 NADP +還原為 NADPH 。

測定 NADPH 在340nm處生成量其生成量與標本中葡萄糖

標籤: 葡萄糖
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