血細胞計數板計算方法
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計算方法是在100倍的顯微鏡下,通過把計數板劃分成若干網格結構,再適當的稀釋血液,通過一定方式來進行計數,通過計算後最終得出血細胞的數量。
血細胞計數板又稱血球計數板,原理是利用血細胞計數板在顯微鏡觀察下進行直接計數,是過去比較常用的微生物計數方式。具體步驟為先對菌懸液進行適當稀釋, 同時對計數板中的計數室進行去污性鏡檢,清洗後才能進行計數。
通常血細胞計數板的計算方法是:
1、視待測菌懸液濃度,加無菌水適當稀釋,以每小格的菌數可數為度。
2、取潔淨的血球計數板一塊,在計數區上蓋上一塊蓋玻片。
3、將菌懸液搖勻,用滴管吸取少許,從計數板中間平台兩側的溝槽內沿蓋玻片的下邊緣滴入一小滴,讓菌懸液利用液體的表面張力充滿計數區,勿使氣泡產生,並用吸水紙吸去溝槽中流出的多餘菌懸液。
4、靜置片刻,使細胞沉降到計數板上,不再隨液體漂移。
5、對於出芽的酵母菌,芽體達到母細胞大小一半時,即可作為兩個菌體計算。
6、計數時若計數區是由16箇中方格組成,按對角線方位,數左上、左下、右上、右下的4箇中方格的菌數。
血細胞計數板的計算方法應該先蓋玻璃片再加計數懸液,因為蓋玻片和計數板之間的凹槽形成的狹縫空間的體積是固定的,加液體時靠虹吸作用將液體吸入。
如果反之,則蓋玻片可能由於已加入的液滴的表面張力作用使其未能嚴密的蓋到計數板表面上,使計數室內的體積增大,從而使計數結果偏高。
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