pcr拖帶怎麼解決

退火溫度較低，可以提高2到3度Mg離子濃度一般的PCR在1.5mM就可以了，不知樓主用的多少，模板濃度較高或者含有其他PCR抑制劑，建議稀釋下模板，延伸時間一般1kb/min，時間太短可能會延伸不完全，迴圈數太高也可能引起拖帶，考慮平臺期，30－35迴圈應該足夠了