![如何设计引物]( "如何设计引物")
- 1、首先要拿到自己要设计引物的目的基因。这里我使用一段GFP基因给大家讲解。将目的基因保存在txt文档里面，或者直接复制下来后在DNAMAN里面新建文档复制进去。下面是我们要设计引物的GFP基因序列。2、打开DNAMAN，选择菜单里面的Primer-->LoadPrimer-->FromInput。将上...
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![pcr怎么确定引物是什么]( "pcr怎么确定引物是什么")
- PCR引物又称为寡核苷酸引物，也就是RNA，是由人工合成的，分为两种，引物1和引物2。由于DNA聚合酶只能从核苷酸链的5'端到3'端进行复制，也就是只能识别3'的尾端。而且只能把核苷酸连到已经和DNA模板互补产生的多核苷酸链上，所以引物1和2分别于双链DNA的两条链的尾部（就是末...
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![f引物和r引物的区别]( "f引物和r引物的区别")
- F：Forwardprimer上游引物R：Reverseprimer下游引物。正向引物，反向引物。引物自身及引物之间不应存在互补序列。连续互补的碱基应该要少于4个。引物应使其G值不要太高，G值越大，则双链越稳定。引物长度和GC含量要适中。引物长度大概为18~28bp，但不应大于38bp，引物过短会影响到扩增...
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![pcr引物序列怎么写]( "pcr引物序列怎么写")
- pcr的引物序列书写都是从5端写向3端，所以正向引物就按原有的序列书写，而反向引物需要反向互补为5端到3端的方向。此外如果要构载体或者定点突变等等，为了方便标识，酶切位点，突变位点的碱基可以写成小写字母以增加辨识度，引物是照样合成的PCR引物设计原则扩增片段大小80-150bp(...
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![什么是上下游引物]( "什么是上下游引物")
- 上游引物就是和要扩增基因片断上游序列结合的引物（引物就是单链寡聚核苷酸，基因扩增需要从引物开始），同理，下游引物指与目的基因片断下游序列结合者。普通的PCR反应（就是用来扩增基因片断的反应），都是有且只有一个上游引物和一个下游引物的，也就是一对引物。因为DNA有两条链啊，半保...
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![pcr引物加多了怎么办]( "pcr引物加多了怎么办")
- 1、最好的办法就是重新设计引物，一般来说引物之间存在大量的碱基互补配对就会容易形成引物二聚体。推荐使用Primer5进行引物设计，软件里会清晰的显示引物二聚体形成的情况。2、如果不想重新设计引物，可以考虑提高退火温度试一试，较高的退火温度会大大降低引物二聚体的形成。3...
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![pcr消耗引物公式]( "pcr消耗引物公式")
- 消耗引物的公式：c1v1=c2v2。10uM浓度的引物，加个1ul足矣。在PCR反应中，经过n次循环，理论上DNA链的数目扩增了2的n次方。PCR的一个循环，一个DNA模板被复制为2个DNA片段。PCR循环次数通常就是30左右。循环数太多了，虽然在一定程度上能够提高产物量，但是由于反应时间过长。PCR技术...
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![pcr技术合成引物的前提]( "pcr技术合成引物的前提")
- PCR全称为聚合酶链式反应，是一项在生物体外复制特定的DNA片段的核酸合成技术前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列，以便根据这一序列合成引物.DNA的合成前端必须是有一小段序列，接着这段序列合成，而不能凭空合成.它前面这一小段序列就是你所要有设计的引物，也就是“一段已...
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![什么是pcr引物内参]( "什么是pcr引物内参")
- 1、实时荧光定量PCR内参:在不同的PCR反应管中已定量的内参和引物，内参用基因工程方法合成。上游引物用荧光标记，下游引物不标记。在模板扩增的同时，内参也被扩增。在PCR产物中，由于内参与靶模板的长度不同，二者的扩增产物可用电泳或高效液相分离开来，分别测定其荧光强度，以内参...
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![pcr引物产物长度控制在多长合适]( "pcr引物产物长度控制在多长合适")
- 一般而言为了确保引物与模板专一性结合，引物长度以18bps以上为宜，最短最好不要低于15bps。但是如果引物过长，则引物内部容易形成二级结构，引物之间也容易形成二级结构，这样反而会影响pcr扩增的效果。因此，一般普通pcr引物以16—25bps长度最好，既最大限度确保扩增特异性，有尽可能...
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![rna的合成需要什么引物]( "rna的合成需要什么引物")
- RNA引物，是DNA复制时合成的一小段RNA，长度大约为10个（5~15个）核苷酸，作为DNA复制的起始点，存在于自然中生物的DNA复制，由于DNA聚合酶不能直接在模板链上合成DNA链，只能从已有的核苷酸的3′—OH端开始延伸DNA链，因此DNA复制需要引物。引物（DNA，RNA的）primer指在核酸合成反应时，作为每个...
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![pcr扩增用的引物怎么确定]( "pcr扩增用的引物怎么确定")
- 若是根据已知序列扩增未知物种的相应序列，可以根据先根据已知序列进行Blast搜索，发现其他同源序列，保存后进行比对，找出其中较保守区域，并根据Primer或Oligo等软件对某条序列进行分析，搜索其中适合做引物的片段，并人工修正不合适部分。也可以设计成兼并引物。如果已经获得序列，只...
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![引物的类型]( "引物的类型")
- 引物按大类来分可分为特异性引物和随机引物两大类。特异性引物就是根据所知序列的上下游序列设计的一对引物，一般用做扩增特定的DNA片段。一般为20~28nt。一般常用的都是特异性引物。随机引物就是一段随机的核苷酸序列，一般为20nt以下。用于扩增出多条条带进行多态性分析之...
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![什么是上游引物和下游引物]( "什么是上游引物和下游引物")
- 上游引物就是和要扩增基因片断上游序列结合的引物(引物就是单链寡聚核昔酸，基因扩增需要从引物开始)，同理，下游引物指与目的基因片断下游序列结合者。普通的PCR反应(就是用来扩增基因片断的反应)，都是有且只有一个上游引物和一个下游引物的，也就是一对引物。因为DNA有两条链啊...
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![pcr技术加入多少种引物]( "pcr技术加入多少种引物")
- 一种引物。需要正反向引物各一条，即一对引物，有些特殊PCR需要多条引物。pcr技术的基本原理类似于dna的自然复制过程，其特异性依赖于靶序列两端互补的寡核苷酸引物。pcr是一种体外dna扩增技术，它依赖于dna聚合酶在模板dna、引物和四种脱氧核苷酸存在下的酶促反应。待扩增的DNA...
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![pcr技术引物和谁结合]( "pcr技术引物和谁结合")
- 这要看你所设计的引物了，引物不同，它结合的位置也不同。在pcr中，94度的变性使dna双链成为单链，50度左右的复性使引物结合到模板链上，复性温度要根据引物的tm值。所以引物不是说只与首末端结合。PCR过程基本为变性，退火，延伸温度高时，DNA变性，双链解开温度降低，引物与DNA结合（温度降...
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![pcr过程中加入内参引物的原因]( "pcr过程中加入内参引物的原因")
- 常说的qpcr，qrt-pcr，都是通过实时（realtime）的方法，测定样品中某个模版的起始量ct值但是呢，由于之前rna提取、反转等步骤，各个步骤存在不同的效率，ct值并无法真实反应样品中模版的绝对量，因此，需要一个内参来做为参考。内参的作用，即通过测量内参，可以在后面分析过程中将不同样品的起...
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![什么是内参引物]( "什么是内参引物")
- pcr内参引物，指的是进行定量pcr分析基因表达水平差异时所选用的参照基因的引物。1、用途不同引物：用于pcr扩增探针：用于标记扩增产物2、本质不同引物：是一小段DNA或RNA，作用是在扩增中作为核苷酸链延伸的起点。探针：带可检测的荧光分子，能特异性结合扩增产物，发出荧光信号被仪器...
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![adaptor引物是什么]( "adaptor引物是什么")
- 引物，是指在核苷酸聚合作用起始时，刺激合成的，一种具有特定核苷酸序列的大分子，与反应物以氢键形式连接，这样的分子称为引物。引物通常是人工合成的两段寡核苷酸序列，一个引物与靶区域一端的一条DNA模板链互补，另一个引物与靶区域另一端的另一条DNA模板链互补，其功能是作为核苷酸...
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![引物图怎么绘制]( "引物图怎么绘制")
- 1、首先要拿到自己要设计引物的目的基因。这里我使用一段GFP基因给大家讲解。将目的基因保存在txt文档里面，或者直接复制下来后在DNAMAN里面新建文档复制进去。下面是我们要设计引物的GFP基因序列。2、打开DNAMAN，选择菜单里面的Primer-->LoadPrimer-->FromInput。将上...
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![rna引物怎么保存]( "rna引物怎么保存")
- 在提取RNA过程中进行到加入75%乙醇后，可使RNA沉淀在4度保存一个月，在-20度保存一年。1、以沉淀的形式保存在无水乙醇中2、以溶液的形式冻存在-80冰箱，并且尽量少冻融3、按试剂商提供的说法，保存在裂解液中可达2年一般这种方法用的比较少，因为每次提RNA都是一气下来，中间没有停...
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![吸引力和吸引物区别]( "吸引力和吸引物区别")
- 前者指的是一种力而后者指的是一种物体。所以它们的区别是:一个是力，另一个是物。吸引力一般指一对具有相反磁极物体相互之间产生的作用力。比如带正极磁铁与带负极的磁铁相互产生吸引力，彼此相吸。其中带正极的磁铁与带负极的磁铁都被称为吸引物。...
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![什么叫引化物]( "什么叫引化物")
- 是指在核苷酸聚合作用起始时，刺激合成的一种具有特定核苷酸序列的大分子，与反应物以共价键形式连接，这样的分子称为引物。引物通常是人工合成的两段寡核苷酸序列，一个引物与靶区域一端的一条DNA模板链互补，另一个引物与靶区域另一端的另一条DNA模板链互补，其功能是作为核苷酸聚...
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![什么是吸引物]( "什么是吸引物")
- 旅游吸引物是指自然界和人类社会中，凡能对游客产生吸引力的各种事物和因素。它是旅游活动的客体。旅游吸引物有广义和狭义之分。狭义的旅游吸引物一般是指有形的旅游资源，包括自然旅游资源和人文旅游资源广义的旅游吸引物除有形的旅游资源外，还包括旅游服务、社会制度、民居...
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![反物质引力特性]( "反物质引力特性")
- 科学家迄今为止没有发现反物质，所谓反物质引力特性也只是理论研究。理论上，反物质的引力特性和普通物质（本文简称正物质）应该是一样的。具体地讲，就是反物质之间互相吸引、反物质和正物质之间互相吸引、反物质也具有正的质量、都适用相同的万有引力公式、当然适用的万有引力常...
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